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红酒中八种合成着色剂检测

导读: 参照《食品中合成着色剂的测定》(GB/T5009.35-2003),建立红酒中的合成着色剂的SPE-HPLC检测方法。

  一、样品信息

样品组分 结构式
柠檬黄
新红  
苋菜红
靛蓝
胭脂红  
日落黄
诱惑红  
亮蓝        

  二.实验目的

  参照《食品中合成着色剂的测定》(GB/T5009.35-2003),建立红酒中的合成着色剂的SPE-HPLC检测方法。

  三.实验方法

  3.1实验试剂

  乙酸;

  甲醇;

  乙酸铵溶液(0.02mol/L):称取1.54g乙酸铵,加水溶解并稀释至1000mL;

  氨水溶液:量取氨水2ml,加水至100mL,混匀;

  甲醇/甲酸(6+4)溶液:量取甲醇60mL,甲酸40mL,混匀;

  柠檬酸溶液:称取20g柠檬酸,加水至100mL溶解,混匀;

  无水乙醇-氨水溶液-水:量取无水乙醇70mL,氨水溶液20mL、水10mL,混匀;

  水(PH=6.0):水加柠檬酸溶液调节PH=6.0;

  水(PH=4.0):水加柠檬酸溶液调节PH=4.0;

  水:超纯水

  合成着色剂储备液:每1.0mL中含柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝各0.5mg,诱惑红0.1mg的水溶液;

  合成着色剂使用液:上述合成着色剂储备液逐级稀释成每1.0mL中含柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝各5μg,诱惑红1μg的水溶液;

  3.2.实验耗材

 

  3.3.试样处理

  取试样(某品牌红酒)20ml,加入合成着色剂混标溶液1.0mL,混匀,用10%氨水调节PH约6.0,将全部试样经过Cleanert® JAX柱,分别用水(PH=4.0)、甲醇/加酸(6+4)溶液6mL淋洗,再用10mL水淋洗,用乙醇-氨水溶液-水(7+2+1)6ml洗脱,收集洗脱液于50℃水浴蒸发至干,加水定容至1.0mL,经0.45μm滤膜过滤,待测。

  3.4液相色谱条件

  色谱柱:Venusil® XBP C18,5μm;4.6*150mm;

  流动相:A:0.02mol/L的乙酸铵溶液(乙酸调节pH=4);

  B:甲醇

  流 速:1.0mL/min;

  进样量:20μL;

  波 长:254nm;

  梯 度:

时间 A% B%
0 95 5
10 80 20
18 40 60
25 40 60
25.01 95 5
40 95 5

 

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