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迪马SPE法快速、低成本检测奶粉中黄曲霉毒素M1

导读: 迪马科技最新开发出新型、快速、低成本的ProElutTM固相萃取方法。该方法可实现与免疫亲和柱法相当的高精度回收率结果,但使用成本却大大降低。

  7月20日,广州市工商局在官网公布了近期对市面上乳制品及含乳食品的抽检结果。由湖南长沙亚华乳业有限公司生产的南山奶粉问题最为严重,5个批次的婴幼儿奶粉均检出含有黄曲霉毒素M1。值得注意的是,知名品牌光明奶油、本土沙湾姜汁撞奶均在不合格之列,爱馨多洋奶粉更是两月三登“黑榜”。

  目前检测黄曲霉毒素的方法通常为免疫亲和层析净化高效液相色谱法和酶联免疫吸附法(ELISA)这两种方法。酶联免疫吸附法(ELISA)操作简单,快速,但灵敏度低且会出现假阳性,需使用免疫亲和柱法进行精确定性、定量,而免疫亲和柱又存在使用繁琐、价格昂贵、储存条件苛刻、保存期短等缺点。

  针对上述问题,迪马科技最新开发出新型、快速、低成本的ProElutTM固相萃取方法。该方法可实现与免疫亲和柱法相当的高精度回收率结果,但使用成本却大大降低。ProElutTM固相萃取法单个样品的检测成本为免疫亲和柱法的1/4,酶联免疫法的1/2,同时ProElutTM固相萃取法简单易操作、不需要专用的大型设备、对操作人员要求不高,特别适用于各种食品生产企业及检测机构,将大大降低黄曲霉毒素的检测成本。

  以下为使用ProElutTM固相萃取柱开发的黄曲霉毒素M1的检测方案,供您参考!

  1 适用范围

  适用于牛奶、奶粉、乳酪等乳制品中黄曲霉毒素M1的检测。

  2 样品准备/提取

  2.1 牛奶、原料乳等液态奶制品

  称取5g样品,加入5mL乙腈,涡旋混合1min;

  再加入10mL乙腈,涡旋混合1 min,4000rpm,离心5min;

  取上清液5mL,作为上样液待净化。

  2.2 奶粉、乳酪等固体奶制品

  称取2g样品,加入5mL水,涡旋混合2min,样品与水充分混匀;

  加入5mL乙腈,涡旋混合1 min;

  再加入10mL乙腈,涡旋混合1min,4000rpm,离心5min;

  取上清液5mL,作为上样液待净化。

  3 SPE柱净化——ProElutTM AFT 黄曲霉毒素检测专用柱 1500mg/12mL(Cat# 65904)

(1)活 化: 10mL乙腈,流出液弃去;
(2)上 样: 将上样液加入柱中,接收流出液;
(3)洗 脱: 10mL乙腈洗脱,收集流出液。合并步骤(2)、(3)流出液;
(4)重新溶解: 在40℃下用减压蒸馏将流出液浓缩至大约2mL,向旋蒸瓶中加入5mL无水乙醇,继续减压蒸馏近干,用10%乙腈水定容至0.5mL,供HPLC分析。

  4 分析条件

色谱柱: Diamonsil C18(2),250 mm×4.6 mm,5μm(Cat# 99603)
流  速: 1.0mL/min
检测器:* 荧光检测器,Ex:365 nm;Em:435 nm
柱  温: 30℃
进样量: 20 μL
流动相: 乙腈:水=25:75

  5 添加回收结果

分析物 添加水平(μg/kg) 回收率/% RSD(n*=4)/%
黄曲霉毒素M1 0.4 90.13 3.42
黄曲霉毒素M1 2 92.61 4.59

  5.1 牛奶中黄曲霉毒素M1添加回收结果

分析物 添加水平(μg/kg) 回收率/% RSD(n*=4)/%
黄曲霉毒素M1 1 90.33 3.75
黄曲霉毒素M1 5 87.61 4.16

  5.2 奶粉中黄曲霉毒素M1添加回收结果

分析物 添加水平(μg/kg) 回收率/% RSD(n*=4)/%
黄曲霉毒素M1 1 92.92 2.75
黄曲霉毒素M1 5 85.16 3.94

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