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VITEK全自动微生物检测系统原理及其应用

2011-09-23 15:36
汉水狂客
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  近年来,微生物的检测鉴定技术已逐步由手工检测走向仪器化和电脑化,并力求简便、快速、准确。由生物梅里埃公司出品的全自动微生物鉴定/药敏分析系统VITEK是目前世界上最先进、自动化程度最高的细菌鉴定仪器之一。VITEK已被许多国家定为细菌最终鉴定设备,并获美国药品食品管理局(FDA)认可。该系统有高度的特异性、敏感性和重复性,还具有操作简便、检测速度快的特点,绝大多数细菌的鉴定在2~18 h内可得出结果。现将该系统的工作原理、主要结构、功能并结合我们使用后的一些体会介绍如下。

  1 工作原理

  VITEK对细菌的鉴定是以每种细菌的微量生化反应为基础,不同种类的VITEK试卡(检测卡)含有多种的生化反应孔,可达30种。将手工分离的待检菌的纯菌落制成符合一定浊度要求的菌悬液,经充填机将菌悬液注入试卡内,封口后放入读数器/恒温培养箱,根据试卡各生化反应孔中的生长变化情况,由读数器按光学扫描原理,定时测定各生化介质中指示剂的显色(或浊度反应,然后把读出信息输入电脑储存并进行分析,再和预定的阈值进行比较,判定反应,再通过数值编码技术与数据库中反应文件进行比较,最后鉴定报告将在显示器上自动显示)并在打印机上自动打印。

  2 VITEK系统的结构组成

  2.1 检测卡 目前VITEK系统的检测卡有14种,微生物常用的有7种,即:革兰氏阳性菌鉴定卡(GPI)、革兰氏阴性菌卡(GNI+)、非发酵菌卡(NFC)、酵母菌卡(YBC)、厌氧菌卡(ANI)、芽胞杆菌卡(BAC)、奈瑟氏菌嗜血杆菌卡(NHI),以及药敏检测卡等。每张检测卡对应接种1份标本,检测卡为一次性消耗品。

  2.2 充填机 将待测菌的菌悬液注入试卡内。

  2.3 读数器/恒温箱 可在培养过程中定时读出细菌在试卡内培养基中的生长变化值。

  2.4 电脑主机/显示器/键盘/打印机 用于储存和分析资料、系统的操作和结果分析鉴定,实验结果的自动显示报告和打印。

  2.5 电源稳压器和UPS 在外围断电的情况下提供电脑主机约10 min持续电源。

  3 VITEK系统的功能

  3.1 可鉴定405种细菌 其中:GPI卡可鉴定凝固酶阳性和阴性的葡萄球菌、肠球菌、草绿色和β溶血链球菌、棒状杆菌属以及李斯特氏菌属和丹毒丝菌等51种;GNI+卡可鉴定肠杆菌科、弧菌科和非发酵菌等116种;NFC卡可鉴定不动杆菌、气单胞菌、产碱杆菌、假单胞菌、弧菌等42种;YBC卡可鉴定假丝酵母(念珠菌)、隐球菌、地霉、丝孢酵母、红酵母等34种;ANI卡可鉴定放线菌、拟杆菌、梭杆菌、乳杆菌、真杆菌、梭菌、消化链球菌等94种;BAC卡可鉴定芽胞杆菌21种;NHI卡可鉴定奈瑟氏菌、嗜血杆菌、金氏菌、摩拉氏菌、布兰汉氏菌等47种。

  3.2 可对澄清液体中的微生物进行计数。

  3.3 检测细菌生长曲线。

  3.4 药敏试验 有70多种药物约50多种药物组合的药敏卡。

  4 实际应用讨论

  实验室自引进VITEK系统后,用已知的金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、李斯特氏菌、O157∶H7、沙门氏菌、志贺氏菌、绿脓杆菌、副溶血弧菌共8株标准菌株进行检测,结果与已知的完全相符。而且鉴定沙门氏菌属只需4 h,志贺氏菌属6 h,缩短了肠道致病菌生化鉴定的时间,操作也简便。

  如1999年7月13日晚某市一大厦中心餐厅发生食物中毒,发病49人。将可疑菌株用VITEK仪器进行鉴定,仅用13 h就得出鉴定结果,而常规鉴定则需24 h。

  又如1999年6月从一胖听的进口烤鳗酱油中分离出可疑酵母菌株,VITEK系统的YBC卡鉴定为丛生丝孢酵母。而常规法鉴定酵母菌需配制各种培养基,一般实验室试剂多不齐全,且鉴定者要有相当的工作经验。

 

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